观察根尖分生组织细胞的有丝分裂方法步骤

1．根尖的培养

具体操作：实验前3～4d，将洋葱放在广口瓶上，底部接触清水。根长约5 cm时可用。

注意问题：置于温暖处，常换水。

分析：因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。

2．装片的制作

具体操作：(1）解离：上午10时至下午2时，剪取洋葱根尖2～3 mm，立即放人盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1：1)的玻璃皿中，室温下解离3～5 min。注意问题：解离要充分,细胞才能分散开来；解离时间也不宜过长。分析：目的：溶解细胞间质，使组织中的细胞相互分离开来(此时，细胞已被盐酸杀死)；时间过长，根尖过于酥软，无法取出。

(2)漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放人盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min。注意问题：漂洗要充分，可换水1～2次。分析：目的：洗去解离液，便于染色。

(3)染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01 g/mL或0.02 g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3～5 min。注意问题：染色时间不宜过长，否则显微镜下一片紫色，无法观察。分析：龙胆紫等为碱性染料，可使染色体着色；醋酸洋红溶液也能使染色体着色。

3．装片的制作

具体操作：制片：用镊子将这段洋葱根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻压载玻片。

注意问题：要弄碎根尖，再垂直向下均匀用力压片，不可移动盖玻片。

分析：目的：使细胞分散，避免细胞重叠，便于观察。

4．观察

具体操作：(1)低倍镜观察：把装片放在低倍镜下,慢慢移动装片，找到分生区细胞。(2)高倍镜观察：移走低倍镜,换上高倍镜,用细准焦螺旋和反光镜把视野澜整清晰，仔细观察，找出处于细胞分裂中期的细胞，再找出前期、后期、末期的细胞。

注意问题：一定要找到分生区；在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。

分析：分生区细胞 特点：细胞呈正方形，排列紧密，不含叶绿体，没有大液泡。有的细胞正处于分裂期。